熒光分光光度法在水質中石油類含量測定上的應用
天津港東科技股份有限公司? 應用分析部
摘要：
將水中石油類物質定義為被正己烷萃取出，并且在激發波長310nm、發射波長360nm下進行熒光檢測的物質。通常這些物質會對人類及自然造成危害和污染。因此通過檢測水中石油類物質可以間接控制水質（地表水、地下水及飲用水）的污染。
本文以測定水質中石油類物質含量為例，依據SL 366-2006《水質 石油類的測定——分子熒光光度法》，應用港東F-380型熒光分光光度計對石油類物質含量進行測定。結果證明此方法操作簡便，線性良好是測定水質中石油類物質含量的理想方法。
方法檢測濃度范圍為0.015～50 mg/L。
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關鍵詞：熒光分光光度法 水質 石油類物質
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一、原理：
水中石油類物質用正己烷萃取后，經激發光源照射，分子產生躍遷。當分子從激發態返回基態的振動能級時，以熒光形式釋放吸收的能量發出分子熒光。此熒光強度在一定濃度范圍內與水中石油類的含量成正比。
二、實驗條件：
1、儀器及附件：
?? 天津港東 F-380 型熒光分光光度計?
?? 熒光石英比色皿???
2、分析條件：
激發波長：310nm
發射波長：360nm
3、藥品：
（1）正己烷（色譜純，本底熒光強度應小于5.5，若不符合需要進行蒸餾提純）；
（2）無水硫酸鈉（優級純，粒狀，臨用前在200～250℃下干燥4h）；
（3）硫酸溶液（優級純，與水體積比（1+1））；
（4）1000mg/L油標準儲備液（國家標準物質中心，用正己烷稀釋成100mgL溶液（臨用前配制）等。
4、其它：
（1）500mL分液漏斗（配聚四氟乙烯旋塞）；
（2）500mL棕色廣口瓶（預先經過定容檢定帶標線）；
（3）50mL容量瓶 若干；
（4）濾紙；
（5）漏斗等。
三、實驗方法
1、水樣采集和保存
單獨定容采水樣，應連同表層水一并采集，并盛裝水樣至樣品瓶標線。
當需要報告一段時間內石油類物質的平均濃度時，應在規定的時間間隔分別采集水樣，而后分別進行測定。
當只測定水中乳化狀態和溶解性油時，采樣時應注意避開漂浮在水表面的油膜層，宜在水面以下20～50cm處采樣。
水樣采集后應立即加入硫酸（與水體積比（1+1））酸化，使水樣pH≤2，并于約4℃下冷藏保存，24h內測定，也可將萃取后的品貯存于帶磨口玻璃塞的玻璃瓶中，約4℃下保存周內進行測定。
2、萃取
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3、空白試樣
量取10.00mL正己烷代替水樣傾入分液漏斗，按上表流程中“將水樣移入分液漏斗”及以后的步驟制備樣品空白試樣。
4、標準曲線
取6個50mL容量瓶分別加入0mL、0.10mL、0.50mL、1.00mL、5.00mL、10.00mL100mg/L的油標準使用液，用正己烷定容至標線，搖勻待測。
此標準系列的濃度分別為0.0mg/L、0.2 mg/L、1.0 mg/L、2.0 mg/L、10.0 mg/L、20.0 mg/L。以正己烷為參比，測定熒光強度，經空白校正后，以熒光強度為縱坐標，以石油類質量為橫坐標，繪制標準曲線。
5、樣品測定
先測定樣品空白溶液的熒光強度，再依次測定各樣品溶液的熒光強度。
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四、計算方法
式中：
c——所測水樣中石油類的含量，mg/L；
m——根據扣除樣品后的熒光強度從校準曲線中查出樣品相應石油類的質量，mg；
v——水樣體積，mL；
注：計算結果需扣除空白值。
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五、測定結果
應用港東F-380型熒光分光光度計的“光度測定”模塊，分別讀取待測溶液的熒光強度，根據計算公式得到水質中石油類物質的含量。
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六、結論
采用熒光分光光度法測定水質中石油類物質的含量，操作簡單，方法準確，是一種理想的方法。
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七、注意事項
1、使用的器皿應避免有有機物的沾污
可以使用硫酸、硝酸、鉻酸洗液等。不應用肥皂以及任何合成洗滌劑清洗。
2、玻璃器皿清洗方法
先用自來水沖洗器皿，然后在被洗容器中倒入清洗液，充分洗滌內壁后，用蒸餾水清洗器皿（至少5次），再用重蒸餾水清洗3次，晾干后用正己烷漂洗三次，自然晾干。
3、應配備一套專門用于油測定的玻璃器皿。
4、分液漏斗的磨口處、活塞處不應涂抹凡士林。
5、殘留在正己烷中的水相可用顆粒狀無水硫酸鈉進行處理，使之脫去水相。不使用粉末狀硫酸鈉是因為其吸水后極易凝固，使過濾困難。
6、萃取分層過程中如果有乳狀液存在于兩相之間，并且大于總體積的1/3，則應將溶液至少靜置1h，以保證水相和有機相充分分離。
7、定容采樣，并將樣品全部移入分液漏斗進行萃取，從而減少油類附著于容器內壁上引起的誤差。
8、如樣品中有兩含量高于50mg/L，應取相應體積萃取液用正己烷稀釋后進行測定。
9、注意熒光石英比色皿的清潔。
檢驗方法：往熒光石英比色皿中注入正己烷測定其熒光強度，然后再重新注入正己烷測定其熒光強度，若前后兩次熒光強度值不變即視為潔凈，否則應清洗比色皿，再進行檢查，直至潔凈為止。
參考資料：SL 366-2006《水質 石油類的測定—分子熒光光度法》?
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